简介
转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和,主要包括mRNA和非编码RNA。转录组研究是基因功能及结构研究的基础和出发点,通过新一代高通量测序,能够全面快速地获得某一物种特定组织或器官在某一状态下的几乎所有转录本序列信息,已广泛应用于基础研究、临床诊断和药物研发等领域。
转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的总和,主要包括mRNA和非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定的生物学过程,已广应用于植物候选基因发掘、功能鉴定及遗传改良等领域。
随着新一代测序平台的市场化,RNA测序(RNA sequenclng,RNA-Seq)技术已成为了转录组学研究的重要手段之一。该技术利用新一代高通量测序平台对基因组cDNA测序,通过统计相关Reads(用于测序的cDNA小片段)数计算出不同mRNA的表达量,分析转录本的结构和表达水平,同时发现未知转录本和稀有转录本,精确地识别可变剪切位点以及编码序列单核苷酸多态性,提供最全面的转录组信息。
转录组测序技术流程主要包括样品制备、文库构建、DNA成簇扩增、高通量测序和数据分析,相对于传统的芯片杂交平台,RNA-Seq技术具有诸多独特优势,转录组测序无需预先针对已知序列设计探针,即可对任意物种的整体转录活动进行检测,提供更精确的数字化信号、更高的检测通量以及更广泛的检测范围,是目前深入研究转录组的强大工具。
转录组测序平台
随着亚太地区第一台Illumina Genome Analyzer Ⅱx测序仪进入天津生物芯片,可以提供测序读长为75*2bp,每次运行数据量达50-60GB。对于4-5Mb的基因组,可确保每个基因组测序量达到400Mb(100倍复盖),足以满足全基因组denovo测序和SNP鉴定的需要。
Solexa高通量测序平台均可对转录组进行测序,由于两种平台各有其优缺点,针对不同的样品情况,需灵活选用。Illumina测序技术的优点是单次测序获得的数据量大,能够得到更高的复盖率,检测到更多低丰度的转录本,在已知基因组序列物种的转录组分析中更具优势。
Roche 454测序技术的优点是单序列读长可以达到500bp,在未知基因组序列物种的转录组分析中更有优势,其较长的读长便于拼接,能获得更好的转录本数据。
Phil Latreille等利用光学图谱研究了X. nematophila基因组,完成了基因组的组装。OpGen公司开发了一种新型的光学图谱技术。天津生物芯片技术责任有限公司于2012年引进国内首台基因组光学图谱,将传统测序技术与基因组光学图谱,可以提供更加完美的基因测序服务。
测序产品功能
1.获得物种或者组织的转录本信息;
2.得到转录本上基因的相关信息,如:基因结构,功能等;
3.发现新的基因;
4.基因结构优化;
5.发现可变剪切;
6.发现基因融合;
7.基因表达差异分析。



















