基本信息
物化性質
胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰髒提取，純化獲得的結晶，再制成的凍幹制劑。易溶于水，不溶于三氯甲烷、乙醇、乙醚等有機溶劑。在pH1.8時，短時間煮沸幾乎不失活；在堿溶液中加熱則變性沉澱，Ca2+有保護和激活作用，胰蛋白酶的等電點為pH10.1。
牛胰蛋白酶原有229個氨基酸組成，含6對二硫鍵，其氨基酸排列順序和晶體結構已被闡明。在腸激酶活自身催化下，酶原的N末端賴氨酸與異亮氨酸殘基之間的肽鍵被水解，釋放出來缬-天-天-天-天-賴6肽，生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個，分子量23800，活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨
酸蛋白酶。
豬胰蛋白酶的化學結構與牛胰蛋白酶十分相似，在氨基酸殘基排列順序中，隻有41個氨基酸殘基不同，但分子構型有很大區别。沉降系數S20W為2.77S，pI=10.8，熱穩定性較牛胰蛋白酶穩定，Ca2+對酶的保護作用不及牛羊的明顯，無螯合Ca2+的中心部位。有6對二硫鍵，斷裂1~2個鍵，均不至于破壞酶分子的完整結構而保護了酶的活性。酶的活力分别相當于牛的72%及羊的61%。
羊胰蛋白酶與牛、豬的相似，但其活力略高于牛和豬的。
胰蛋白酶專一作用有堿性氨基酸精氨酸及賴氨酸羧基所組成的肽鍵。酶本身很容易自溶，由原先的β-胰蛋白酶酶轉化為α-胰蛋白酶，再進一步降解為拟胰蛋白酶，乃至碎片，活力也逐步下降而喪失。
除存在于脊椎動物外，還存在于蠶、海盤車、蝲姑、放線菌等範圍廣泛的生物體中。另外與高等動物的血液凝固和炎症等有關的凝血酶、纖溶酶、舒血管素等蛋白酶在化學結構和特異性等方面與胰蛋白酶具有密切的關系，可以認為這些酶是從共同的祖先酶在進化過程中分化而來的。胰糜蛋白酶與彈性蛋白酶在結構和催化機制方面也具有密切關系，但其特異性則完全不同。
胰蛋白酶系自牛、羊或豬胰中提取的一種蛋白水解酶。中國藥品标準規定按幹燥品計算，每1mg的效價不得少于2500單位。由牛、羊、豬胰髒提取而得的一種肽鍊内切酶，隻斷裂賴氨酸或精氨酸的羧基參與形成的肽鍵。白色或米黃色結晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。分子量24000，pI10.5，最适pH值7.8～8.5左右。pH>9.0不可逆失活。Ca2+對酶活性有穩定作用；重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對其活性有強烈抑制。臨床用于抗炎消腫，工業上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。
藥典标準
來源含量
本品系自豬、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按幹燥品計算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。
制法要求
本品應從檢疫合格的牛、羊或豬胰中提取，生産過程應符合現行版《藥品生産質量管理規範》的要求。
性狀
本品為白色或類白色結晶性粉末。
鑒别
取本品約2mg，置白色點滴闆上，加對甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液0.2ml，攪勻，即顯紫色。
檢查
酸度
取本品，加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液，依法測定（2010年版藥典二部附錄ⅥH），pH值應為5.0～7.0。
溶液的澄清度
取本品，加0.9%氯化鈉溶液溶解并制成每1ml中含10mg的溶液，依法檢查（2010年版藥典二部附錄ⅨB），溶液應澄清。
糜蛋白酶-底物溶液的制備
取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯23.7mg，置100ml量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（取0.067mol/L磷酸二氫鉀溶液38.9ml與0.067mol/L磷酸氫二鈉溶液61.1ml，混合，pH值為7.0）50ml，溫熱使溶解，冷卻後再稀釋至刻度，搖勻。冰凍保存，但不得反複凍融。
供試品溶液的制備
取本品适量，精密稱定，加0.001mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.25mg的溶液。
測定法
取底物溶液2.0ml、0.001mol/L鹽酸溶液0.2ml與上述磷酸鹽緩沖液（pH7.0）1ml，混勻，作為空白。取供試品溶液0.2ml與底物溶液（預熱至25℃±0.5℃）3.0ml，立即計時并搖勻，使比色池内的溫度保持在25℃±0.5℃，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄ⅣA），在237nm的波長處，每隔30秒讀取吸光度，共5分鐘，每30秒鐘吸光度的變化率應恒定，且恒定時間不得少于3分鐘。以吸光度為縱坐标，時間為橫坐标，作圖，取在3分鐘内成直線部分的吸光度，按下式計算。
式中P為每2500胰蛋白酶單位中含糜蛋白酶的量，單位；
A2為直線上開始的吸光度；
A1為直線上終止的吸光度；
T為A2至A1讀數的時間，分；
W為測定液中含供試品的量，mg;
0.0075為在上述條件下，吸光度每分鐘改變0.0075，即相當于1個糜蛋白酶單位。
每2500單位胰蛋白酶中不得多于50單位的糜蛋白酶。
幹燥失重
取本品适量，以五氧化二磷為幹燥劑，在60℃減壓幹燥4小時，減失重量不得過5.0%（2010年版藥典二部附錄ⅧL）。
效價測定
底物溶液的制備
取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽85.7mg，加水溶解使成100ml，作為底物原液；取10ml，用磷酸鹽緩沖液（取0.067mol/L磷酸二氫鉀溶液13ml與0.067mol/L磷酸氫二鈉溶液87ml混合，pH值為7.6）稀釋成100ml，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄ⅣA），恒溫于25.0℃±0.5℃，以水作空白，在253nm的波長處測定吸光度，必要時可用上述底物原液或磷酸鹽緩沖液調節，使吸光度在0.575～0.585之間，作為底物溶液。制成後應在2小時内使用。
供試品溶液的制備
精密稱取本品适量，加0.001mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含50～60胰蛋白酶單位的溶液。
測定法
取底物溶液3.0ml，加0.001mol/L鹽酸溶液200μl，混勻，作為空白。另取供試品溶液200μl，加底物溶液（恒溫于25.0℃±0.5℃）3.0ml，立即計時，混勻，使比色池内的溫度保持在25℃±0.5℃，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄ⅣA），在253nm的波長處，每隔30秒鐘讀取吸光度，共5分鐘。以吸光度為縱坐标，時間為橫坐标，作圖；每30秒鐘吸光度的改變應恒定在0.015～0.018之間，呈線性關系的時間不得少于3分鐘。若不符合上述要求，應調整供試品溶液的濃度，再作測定。在上述吸光度對時間的關系圖中，取成直線部分的吸光度，按下式計算：
式中P為每1mg供試品中含胰蛋白酶的量，單位；
A1為直線上終止的吸光度；
A2為直線上開始的吸光度；
T為A1至A2讀數的時間，分；
W為測定液中含供試品的量，mg；
0.003為在上述條件下，吸光度每分鐘改變0.003，即相當于1個胰蛋白酶單位。
制劑
注射用胰蛋白酶
醫學檢查
檢查名稱
胰蛋白酶
分類
血液生化檢查>酶類測定
測定原理
同酶速率法測定。
試劑
同酶速率法測定。
操作方法
同酶速率法測定。
正常值
（1）RIA法：陰性。
（2）酶速率法（37℃）：十二指腸液：150～600μg/ml
化驗分析
（1）升高：急性胰腺炎、慢性胰腺炎（複發期）、胰腺癌、腎功能不全等。
（2）降低：胰腺外分泌功能不全（慢性胰腺炎後期）。
附注
急性胰腺炎時血清胰蛋白酶可上升至正常人的2～400倍，一般在10～15天恢複正常。
相關疾病
急性胰腺炎、慢性胰腺炎、胰腺癌
藥品說明
藥理作用
胰蛋白酶為肽鍊内切酶，對精氨酸和賴氨酸肽鍊具有選擇性水解作用，可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會消化正常組織，而能分解黏痰、膿性痰等黏性分泌物，能促進抗生素、化療藥物向病竈滲透。
适應證
1.用于膿胸、血胸、外科炎症、潰瘍、創傷性損傷、婁管等所産生的局部水腫、血腫、膿腫。
2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和膿性痰。
3.用于治療毒蛇咬傷，曾試用于竹葉青、銀環蛇、眼鏡蛇、蝮蛇等毒蛇咬傷的各型病人800餘例，均獲治愈。
禁忌證
1.肝腎出血、出血傾向及結核性膿腫患者禁用。
2.不可用于急性炎症及出血空腔中。
用法用量
1.每次2.5～5mg，用蒸餾水5～10ml溶解。
2.一般應用：1次5000單位，每日1次肌注，用量酌情而定。為防止疼痛，可加适量普魯卡因。局部用藥視情而定，可配成溶液制劑（PH7.4～8.2，微堿性時活性最強）、噴霧劑、粉劑、油膏等，用作體腔内注射、患部注射、噴霧、濕敷、塗搽等。
3.治蛇毒：取注射用結晶胰蛋白酶2000單位1～3支，加0.25%～0.5%鹽酸普魯卡因（或注射用水）4～20ml稀釋，以牙痕為中心，在傷口周圍作浸潤注射，或在腫脹部位上方作環狀封閉1～2次。如病情需要可重複使用。若傷肢腫脹明顯，可于注射本品30分鐘後，切開傷口排毒減壓（嚴重出血者例外），也可在腫脹部位針刺排毒。如傷口已壞死、潰爛，可用其0.1%溶液濕敷患處
注意事項
1.不可作靜注。用前需作劃痕試驗，應注意可能産生過敏反應。
2.吸取注射液後應另換針頭，以免注射時疼痛。
3.外用時，可采用注射用制劑以緩沖液溶解，但必須在3小時内用畢。
不良反應：
1．注射局部疼痛、硬結。
2．本品可引起組胺釋放，産生全身反應，有寒戰、發熱、頭痛、頭暈、胸痛、腹痛、
皮疹、血管神經性水腫、呼吸困難、眼壓升高、白細胞減少等。症狀輕時不影響繼續治療，給予抗組胺藥和對症藥物即可控制，嚴重時應即停藥。
3．本品偶可緻過敏性休克。
專家點評
胰蛋白酶能使痰、血凝塊溶化變稀，易于引流排痰，加速創面愈合淨化，促進肉芽組織增生，而不損傷正常組織，臨床上有消炎消腫功能。
其他
細胞培養
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關，在pH為8.0、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時，可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25%，用電子天平準确稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃内過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超淨台内用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。
3.分裝成小瓶于-20℃保存以備使用可！
