薄層層析法

薄層層析法

分析方法
薄層層祈法又稱“薄層色譜分析法”。把吸附劑和支持劑均勻塗布在玻璃或塑料闆上形成薄層後進行色層分離的分析方法。矽膠薄層層析法分離石榴皮的鞣質成份,斑點清晰,重現性好,靈敏度高,薄層結果證實,石榴皮鞣質含沒食子酸成分,為石榴皮藥用價值的研究提供科學依據。[1]
    中文名:薄層層析法 外文名:Thin layer chromatography 所屬學科: 作用:分離混合物 目的:分析物分離 優點:操作簡便,設備簡單 應用:石油、化工、醫藥、生化

簡介

薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為矽膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣,除吸附法外,也可進行分配、離子交換、分子排阻等機理的層析,即将鋪制薄層的材料相應換為塗以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等,其操作與吸附法基本相同。

過程

制闆

鋪制薄層闆時,要求基底闆潔淨平整,可用幹法或濕法鋪制。現常用濕法制闆,即将吸附劑和粘合劑(如燒石膏)按一定比例混合,加入适量水調勻,用塗布器将此勻漿緩慢地移過基底闆,放置晾幹,再經适當烘烤活化後即可使用。如不加粘合劑和水,直接将吸附劑均勻地鋪成薄層,則為幹法制闆。現在市場上已有各種制好的薄層闆出售,統稱預制闆。

展開

有多種方式,以上行法最為常用。将薄層闆垂直或傾斜放置,将展開溶劑加于低部,使之自下向上移動。下行法則為用濾紙将溶劑引至薄層上端,使其自上向下流動。平行展開時,将闆平放,溶劑被吸上至薄層闆點有樣品的一端,進行展開。使用圓形薄層闆時,将樣品點在圓心附近,使溶劑自圓心向圓周方向移動,稱為環形展開或徑向展開;将樣品點在圓周位置,使溶劑自圓周向圓心移動的為向心展開,适用于f值大的組分的分離。将點樣品處附近的吸附劑刮去,使溶劑隻能通過樣品點附近的較窄部分前進展開,因而溶劑前緣呈弧形的展開方式,也稱徑向展開,這種方式對較難分離的組分可能效果好些。

展開一次後取出薄層闆使溶劑揮發,再用同一溶劑或換用其他溶劑再次沿此方向展開的稱多次展開。将樣品點在方形薄層闆的一角,先沿着一個方向展開,然後将闆轉動90°,再沿着另一方向展開的為雙向展開。多次展開和雙向展開都可加強分離效果。

特點

操作簡便,設備簡單,除光密度計外,不需特殊設備,分離效果較好,時間較短,一塊闆上可同時分離許多樣品。除低沸點物質外,各種無機和有機化合物都可進行分離。

應用和發展

廣泛應用于石油、化工、醫藥、生化等方面。樣品用量一般為幾至幾百微克,是一種較實用、有效的微量分離分析方法。此法也可用于分離制備較大量的樣品,即使用較大較厚的薄層闆,将樣品溶液在起始點處點成條帶狀,這樣可以分離毫克量樣品。

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