簡介
特點:靈敏度更高10-10-10-12g/ml,應用不如UV廣泛。
應用:①直接熒光光度法;②作為HPLC的檢測器(用的多)
根據物質分子吸收光譜和熒光光譜能級躍遷機理,具有吸收光子能力的物質在特定波長光(如紫外光)照射下可在瞬間發射出比激發光波長長的光,即熒光。
SO2分子受特定光照射後處于激發态的SO2分子返回基态時發出熒光,其熒光強度與SO2呈線性關系,從而可測出氣體濃度。當檢測儀器系統确定後,熒光總光強I與SO2濃度的之間的關系可表示為:I=KC在穩定的條件下,這些參數也随之确定,k可視為常數。因此,式I=kC表示的紫外熒光光強I與樣氣的濃度C成線性關系。這是紫外熒光法進行定量檢測的重要依據。
直接測定法
利用物質自身發射的熒光進行測定分析。
間接測定法
由于有些物質本身不發射熒光(或熒光很弱),這就需要把不發射熒光的物質轉化成能發射熒光的物質。例如用某些試劑(如熒光染料),使其與不發射熒光的物質生成絡合物,各種絡合物能發射熒光,再進行測定。因此熒光試劑的使用,對一些原來不發熒光的無機物質和有機物質進行熒光分析打開了大門,擴展了分析的範圍。
不管是直接測定,還是間接測定,一般的采用标準工作曲線法,取各種已知量的熒光物質,配成一系列的标準溶液,測定出這些标準溶液的熒光強度,然後給出熒光強度對标準溶液的濃度的工作曲線。在同樣的儀器條件下,測定未知樣品的熒光強度,然後從标準工作曲線上查出未知樣品的濃度(即含量)。
一般常用的熒光分析儀器有:目測熒光儀(熒光分析燈),熒光光度計和熒光分光光度計三種。
特點
熒光分析是一種先進的分析方法,它比電子探針法、質譜法、光譜法、極譜法等都應用的較廣泛和普及,這同熒光分析具有很多優點分不開的。熒光分析所用的設備較簡單,如目測熒光儀和熒光光度計構造非常簡單完全可以自己制造。比起質譜儀、極譜儀和電子探針儀來它在造價上要便宜很多倍,而且熒光分析的最大特點是:分析靈敏度高、選擇性強和使用簡便。同時具備這三大特點的儀器并不多。
靈敏度高
熒光分析法的最大特點是靈敏度高,對某些物質的微量分析可以檢測到10克數量級,如污水中的銀含量用熒光分析法可以檢測到1x10克,汞可以檢測到1x10克。對一些激素亦可檢測到10克。熒光分析的靈敏度比分光光度法的靈敏度高2~3個數量級,這是由于熒光分析的熒光和入射光之間成直角,而不在一條直線上,所以是在黑背景下檢測熒光。
而分光光度法的接收器與入射光在一條直線上,所以它是在亮背景下檢測。因此熒光分析法比分光光譜法靈敏度高。分光光譜法的靈敏度一般隻能檢測到10克,兩者相差三個數量級。當然熒光分析法比起帶電子顯微鏡的電子探針法靈敏度又低一些(它可達10克數量級),然而電子探針儀器價格昂貴,使用不方便。
選擇性強
熒光分析的第二個特點是選擇性強,特别是對有機化合物而言。因熒光光譜既包括激發光譜又包括發射光譜,凡是能發射熒光的物質,必須首先吸收一定波長的紫外線,而吸收了紫外線後不一定就發射熒光。能發射熒光的物質,其熒光波長也不盡相同。如果即使熒光光譜相同的話,而它的激光光譜也不一定相同。
反之如果它們的激發光譜相同,則可用發射光譜把它們區分開來,因此供選擇的餘地是比較多的。所以熒光分析的選擇性很強。例如有兩種物質,它們的熒光光譜很相似,不易把它們分開。但它們的激光光譜不會相同,因此就可用掃描激光光譜把它們分開。如果用分光光譜法就難以辦到這一點,因為分光光譜隻能得到待測物質的特征吸收光譜。所以分光光譜法的選擇性就沒有熒光分析法強。



















