血清堿性磷酸酶

血清堿性磷酸酶

磷酸單酯水解酶類之一
堿性磷酸酶(ALP))屬磷酸單酯水解酶,是一組特異的磷酸酯酶。該酶廣泛分布于人體組織和體液,以骨、肝、乳腺、小腸、腎中含量較高,其大部分由骨細胞産生,小部分來自肝,經膽汁排入腸道。ALP測定方法主要是比色法和連續監測法。
    中文名:血清堿性磷酸酶 外文名: 定義: 英文名:alkaline phosphatase 分類:血液生化檢查、酶類測定 辨别方法:比色法、連續監測法 分布:人體組織和體液

辨别原理

(1)比色法:ALP在堿性條件下使磷酸苯二鈉水解,生成磷酸和遊離酚,後者與4-氨基安替比林作用,并經鐵氰化鉀氧化成紅色醌類化合物,其顔色的深淺與ALP活性成正比。

(2)連續監測法:ALP在堿性條件下,使磷酸對硝基苯酚(4-NPP)釋放出磷酸基團,AMP參與磷酸酰基的轉移,促進酶反應速率,生成遊離的對硝基苯酚(4-NP),并形成黃色的醌,其吸光度的增高速率與酶活力成正比。

介紹

堿性磷酸酶幾乎存在于機體的各個組織,但以骨骼、牙齒、肝髒、腎髒含量較多。正常人血清中的堿性磷酸酶主要來自骨骼,由成骨細胞産生。ALP經肝膽系統進行排洩。所以當AKP産生過多或排洩受阻時,均可使血中AKP發生變化。臨床上常借助ALP的動态觀察來判斷病情發展,預後和臨床療效。正常人血清中的堿性磷酸酶主要來自肝和骨骼,堿性磷酸酶測定主要用于診斷肝膽和骨骼系統疾病,是反映肝外膽道梗阻、肝内占位性病變和佝偻病的重要指标。

正常值

酶速率法(37℃):成人:40~160U/L;兒童:<350U/L;磷酸苯二鈉法:成人:3~13Kat單位;兒童:5~30kat單位;動态法:成人:20~110U/L;青少年:1.男性:<750U/L;2.女性:<500U/L;兒童:<500U/L;嬰兒:50~240U/L。

臨床意義

升高:阻塞性黃疸,黃疸型肝炎,肝癌等均可引起。骨損傷或疾病使成骨細胞所含高濃度的堿性磷酸酶釋放入血液中,引起ALP增高。主要來自肝和骨骼,堿性磷酸酶測定主要用于診斷肝膽和骨骼系統疾病,是反映肝外膽道梗阻、肝内占位性病變和佝偻病的重要指标

試劑

比色法

①0.1mol/L碳酸鹽緩沖液(pH10.0):稱取無水碳酸鈉6.36g,碳酸氫鈉3.36g,4-氨基安替比林1.5g,溶于800ml蒸餾水中,移入1000ml容量瓶内,加蒸餾水至刻度,置棕色瓶内保存。②20mmol/L磷酸苯二鈉溶液:稱取磷酸苯二鈉(AR)2.18g,迅速加入已煮沸的500ml蒸餾水中,冷卻後加入氯仿2ml防腐,冰箱保存。此為基質液。③鐵氰化鉀溶液:稱取鐵氰化鉀2.5g,硼酸17g,分别溶于400ml蒸餾水中,混合後加水至1000ml,置棕色瓶内避光保存。出現藍綠色應棄去。④酚标準貯存液(1mg/ml):稱取重蒸餾酚1.0g,溶于0.1mol/L鹽酸中,并加至1000ml刻度。也可購買标準液。⑤酚标準應(0.05mg/ml):取酚标準貯存液5ml,加蒸餾水至100ml。

連續監測法

①1.8mol/L AMP緩沖液(pH10.3):稱取2-氨基-2甲基-1-丙醇(AMP,MW89.14)160g,加1mol/L鹽酸320ml混合,加500ml新煮沸已涼的蒸餾水,調pH至10.3±0.02(30℃),并加上述蒸餾水至1000ml,置緊塞瓶中于冰箱保存。

②10.5mmol/L氯化鎂溶液:稱取氯化鎂(MgCl2·6H2O,MW20 3.31)0.21g,溶于水中,并稀釋至100ml,室溫保存。

③31.5mmol/L磷酸對硝基苯酚溶液(4-NPP):稱磷酸對硝基苯酚二鈉鹽(含6分子水,MW 371.15)120.8mg,溶于100ml蒸餾水中,置棕色瓶内于冰箱保存。

④底物緩沖液(0.84mol/L AMP,15mmol/L 4-NPP,0.5mmol/L MgCl2,pH10.3)将AMP、4-NPP和MgCl23種溶液按10∶10∶1混合,37℃預溫待用。

偏高原因

代謝異常原因。

堿性磷酸酶主要用于阻塞性黃疸、肝癌、膽汁淤積性肝炎等的檢查,阻塞性黃疸、原發性肝癌、繼發性肝癌、膽汁淤積性肝炎都會使堿性磷酸酶偏高。

膽道排洩異常:堿性磷酸酶是需要經過肝髒,然後由膽汁排出,當排洩過程中出現異常,那就會引起堿性磷酸酶偏高。

骨骼組織原因:由于骨組織中此酶亦很活躍。因此,孕婦、骨折愈合期、骨軟化症。佝偻病、骨細胞癌、骨質疏松等血清堿性磷酸酶會升高。

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